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※ 本文為 MindOcean 轉寄自 ptt.cc 更新時間: 2021-09-09 15:00:08
看板 Gossiping
作者 yabia (*~亞比醬~*)
標題 Re: [問卦] 基因定序的原理?
時間 Wed Sep  8 15:27:54 2021


※ 引述《fifthfloorme (躌艛)》之銘言:
: 標題: [問卦] 基因定序的原理?
: 時間: Wed Sep  8 14:44:42 2021
:
: 小妹文組,想問基因定序為什麼要那麼多天?:
: 我以為就是把基因拿去顯微鏡底下觀察一下欸!生物課不是都有萃取過DNA嗎?:
: 還是說,要放大很多倍才能看得清楚序列呢?求解!

關於基因檢測的相關全條目,初版是我10年前寫的,好像沒被其他編輯者改多少:
https://reurl.cc/EZK4eA

基因定序
https://reurl.cc/aNlLDX

歡迎內行的各位幫忙編修~  ^^

這邊我要挑一點特別提出來給各位版友認識,基因定序之父是台灣人: 陳弈雄博士

: → Goog1e: 生物課萃取DNA??????                      150.116.147.25 09/08 14:45
現在的萃取DNA實驗,已經到小學生自然課就有做過了喔~
: 推 Neisseria: 用定序儀跑的。要跑一至兩週            112.105.246.64 09/08 14:48
不用,純做實驗、上機跑數據的話,一天以內(正確來說,幾小時內)就出來了~

整個過程最花時間的是採樣送件及確認受檢者的"跑病例流程"階段。 <=人文的

問題永遠比做科學的實驗還複雜。


現在科技進步很快,基因定序儀已經到第四代了,一個人的"全基因圖譜"才需要

跑到幾天。

: → SRadiant: 跑1、2週是20年前的事吧...              111.82.244.251 09/08 14:49
10年前的事....  20年前是多個國家,上百的研究團隊跑了數年。

現在科技進步很快的。  ^^

: 推 vaya: 推 要用電顯。 選我正姐                       39.11.36.226 09/08 14:51
電顯也看不到"分子"層次,DNA可是分子鏈....

: 推 owlonoak: 20年前還沒有完全定序這種技術          220.143.192.200 09/08 14:51
嗯.... 也不是這麼說......

: 推 Neisseria: 所以現在定序要多久?一至三天?        112.105.246.64 09/08 14:52
做實驗不用,但整個流程(含採檢、送樣、實驗、上機、出報告....等全部)可能要。

: 推 LukaDoncic: 要先RT 再PCR 再送NGS 再用程式分析se   35.130.71.243 09/08 14:52
RT跟PCR是一起的.... 而且真有需要用到RT?

: → SRadiant: 記什麼,因為有3萬個左右所以要花一些    111.82.244.251 09/08 14:52
: → SRadiant: 時間                                   111.82.244.251 09/08 14:52
: → LukaDoncic: quence 可能還要重複幾次               35.130.71.243 09/08 14:52
: 推 scps990607: 搜尋「次世代定序NGS」了解一下        27.242.135.137 09/08 14:53
GJ  ^^
: 推 kavengany: DNA電泳慢慢跑                        223.139.161.184 09/08 14:53
這實驗不用跑電泳。
: 推 gn01657736: DNA才問世30年,技術還不成熟一堆文      49.217.198.4 09/08 14:53
看你說的技術是哪種...  比如剪接的技術確實還不純熟(基因治療)。

但論定序,它的發展已經很久、很熟了。

: → gn01657736: 組,ATGC就一堆人就看不懂了             49.217.198.4 09/08 14:53
: → SRadiant: 病毒幾萬個鹼基完整定序沒問題啊         111.82.244.251 09/08 14:54
沒錯~  不過PCR永遠有個問題,就是在複製的時候會出錯。

: 推 owlonoak: 其實上面有一個鄉民還真的說對了        220.143.192.200 09/08 14:54
: → owlonoak: 真的是叫DNA排好報數                   220.143.192.200 09/08 14:54
: → owlonoak: 是長度從一個鹼基到最後一個鹼基這樣    220.143.192.200 09/08 14:55
: → owlonoak: 檢查這一堆長度不等的DNA的最末端鹼基   220.143.192.200 09/08 14:55
: → owlonoak: 這就是目前定序的原理                  220.143.192.200 09/08 14:56
: → SRadiant: NGS出來也快20年囉,2003年就有發表一    111.82.244.251 09/08 14:56
: → SRadiant: 個腺病毒全基因組                       111.82.244.251 09/08 14:5710年
: 推 duckie: Sanger定序法 應該不會用到NGS             60.251.121.124 09/08 14:57
: → duckie: NGS太貴了                                60.251.121.124 09/08 14:57
你內行!!

: 推 pastoris: 採後萃取蛋白質體,用delta序列當引子作   150.116.67.54 09/08 14:58
: → pastoris: PCR,結果sequence分析                   150.116.67.54 09/08 14:58
.....  翠蛋白質體???? 你確定???? (@_@)?

: → SRadiant: 病毒基因體很小,不貴,而且公家的錢     111.82.244.251 09/08 14:58
只要做分子實驗,沒有不貴的~

: 推 pastoris: 那會用什麼作primer夾出來?              150.116.67.54 09/08 15:03
: → SRadiant: https://i.imgur.com/oKP7BNV.jpg        111.82.244.251 09/08 15:03
: → SRadiant: 台灣不知不覺也上傳一堆序列了,剛剛還   111.82.244.251 09/08 15:04
: → SRadiant: 看到有人說定序會不會造假...            111.82.244.251 09/08 15:04
: → SRadiant: https://i.imgur.com/7SnEEYq.jpg        111.82.244.251 09/08 15:04
: → SRadiant: 有些資訊比較齊全的,會有定序技術,像   111.82.244.251 09/08 15:05
: → SRadiant: 這個是用Illumina Iseq                  111.82.244.251 09/08 15:05
: → SRadiant: Illumina iseq 100的話就是NGS           111.82.244.251 09/08 15:07
你內行~ GJ~  ^,^


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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 202.39.33.67 (臺灣)
※ 文章代碼(AID): #1XE6Nypr (Gossiping)
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Gossiping/M.1631086076.A.CF5.html
※ 編輯: yabia (202.39.33.67 臺灣), 09/08/2021 15:28:41
xzcb2008 
xzcb2008: 我印象啥小sanger法1F 111.82.206.119 台灣 09/08 15:28
angel902037: 大神2F 36.230.201.164 台灣 09/08 15:28
ho83leo: 你太專業了3F 39.8.193.220 台灣 09/08 15:28
moai513: 推4F 101.12.18.61 台灣 09/08 15:32
eldar: 請問要怎麼分離人和病毒的DNA呢5F 140.112.235.23 台灣 09/08 15:33
eldar: 更正,應該是RNA?
有特定序列可以用primer夾,跑電泳切膠、PCR...等,我懂得是老套的做法,需要

RNA的量比較大,不然光過程就被降解掉一堆了,以前做RNA的研究的人很辛

苦。  現在有很多KIT可以用,不需要我懂得那種老方法了,你可以去查一查

一些廠商提供的RNA KIT。

ms0286415: 我生化被當的咖QQ7F 180.176.139.245 台灣 09/08 15:36
分生是現在的科科人的顯學,你生化不好好讀,分生就別想過了....
Mikoto41: 不需要RT嗎? 冠狀病毒不是RNA病毒嗎?8F 101.9.135.19 台灣 09/08 15:49
Mikoto41:  還是現在RNA也可以直接pcr?
SRadiant: 不是討論病毒基因體嗎?你說幾十個國家10F 111.82.244.251 台灣 09/08 15:50
SRadiant: 那是人類基因體
喔,我以為你在談"歷史",在講之前的人類基因體的事....

病毒基因體小,很容易測完,但要抓有意義的片段就好,多抓的是沒意義的~

反而干擾你做研究分析~
SRadiant: 10年前病毒基因體1、2天就有,不用1~2週12F 111.82.244.251 台灣 09/08 15:52
Yahweh: 分生是20年前科科人的顯學,現在就基本功13F 1.162.0.58 台灣 09/08 15:53
也對啦~ 現在是基本功了~  時代的眼淚~ (Q_Q)
Yahweh: 要RT14F 1.162.0.58 台灣 09/08 15:54
我以為已經有新產品可以替代這老方法了.... 現在還是要RT啊...  (=..=)

沒有我想像中的進步得快啊....
Yahweh: 自從human genome proejct 完成之後 科科15F 1.162.0.58 台灣 09/08 16:08
你也不想想該內容是我10幾年前寫的~  既然是內行人,有空幫我編修啦~

wj115: 現在能不轉成cDNA就PCR?16F 140.117.248.2 台灣 09/08 16:08
Yahweh: 人改玩各種 -omics 然後又回到整體論層次17F 1.162.0.58 台灣 09/08 16:09
NEWSTAY: 有one step RT-PCR臨床有沒有用不知道18F 70.236.210.38 美國 09/08 16:09
Yahweh: 的生物學研究19F 1.162.0.58 台灣 09/08 16:09
wj115: 我只是好奇同時做你要怎麼分離RNA RT可以特20F 140.117.248.2 台灣 09/08 16:10
wj115: 別辨識polyA tail
※ 編輯: yabia (202.39.33.67 臺灣), 09/08/2021 16:12:38
wj115: 因為你抽的時候也得到非mRNA的東西22F 140.117.248.2 台灣 09/08 16:11
aimin: 第四代?我只認識第三代nano pore? 第四代23F 39.12.5.50 台灣 09/08 16:23
aimin: 不是還在開發中 商用了嗎?
nggfn: RNA抽出來不RT會不會很容易裂解,應該不會25F 1.161.198.188 台灣 09/08 16:53
nggfn: 有人這麼勇敢吧
cocogg: 人文(x) 人為/人事/行政流程(o)27F 223.136.151.198 台灣 09/08 16:54
cocogg: 病毒基因體小,確實(比較)便宜啦!
avans: 推29F 223.140.111.148 台灣 09/08 16:56
kerry0496x: 如果是PCR我懂一點,萃取病毒的RNA後30F 36.231.70.63 台灣 09/08 16:59
kerry0496x: 會轉錄成DNA再進行PCR
jasonchangki: 英國變種的源頭抓到但媒體都不報32F 49.217.238.173 台灣 09/08 17:25
Trochilus: 專業推33F 223.140.114.56 台灣 09/08 17:33
flyslam: 推專業文34F 223.137.2.208 台灣 09/08 18:13
TsaiPC: 電顯當然看得到分子,只是不會用來定序35F 49.104.18.81 日本 09/08 18:43
saedn: 可以敲碗下一篇文章嗎!!! 敲敲!!36F 114.39.181.102 台灣 09/08 22:23

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